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我国是世界上三大锻木(原木)灵芝产区之一(另有韩国、日本),产量占世界总产量的50%以上。浙江从1989年开始灵芝人工栽培试验并取得成功,1992年农民利用纯锻木仿生法大规模栽培灵芝,产业化经营至2007年,平均每年锻木投放量3000立方米(高时达7000立方米),年产干灵芝150吨,占全国总量的四分之一。2008年以来浙江省中药产业协会将灵芝重点扶持产业,市场上灵芝产品越来越多,包括灵芝子实体、抱子粉、菌丝体为主要成分的和药品,广泛应用于肿瘤、冠心病、心绞痛、高脂血症、高血压病、、慢性支气管炎和哮喘、神经衰弱、肝炎等。但国内外灵芝药材及其产品均无系统的质量控制体系,对灵芝及其产品质量的控制大多都停留在主要活性成分定性评价的水平上,灵芝品种使用也是几十年一成不变,单一品种的重复使用,菌种种性退化明显,与“、有效、稳定、可控叩勺中药现代化、国际化要求存在相当差距,建立灵芝功效成分定性与定量结合的评价方法,控制灵芝及其产品质量,对灵芝产业可持续发展具有重要意义。
种植流程截椴装袋将原材截成30cm长的短椴木,直径超过20cm者,辟开材树皮朝外,用利刀修光断面、枝叉面,以免剌破袋膜,引起感染杂菌,将木材装入40x65cm规格的0.005厚的低压聚乙烯袋内,每袋装3---6段,用绳子扎紧袋口。蒸汽灭菌将菌袋按排叠放,排间留有20厘米的空隙,采用一层横排一层竖排“井”字形叠放,排放好底层覆盖农膜,外层再盖一层彩条布,四周用沙袋将农膜及彩条布压实,防止漏气。当温度达到100T后,持续10h不间断加热,灭菌结束后,闷3—5h,等灶内温度下降到60T以下,取出菌袋放入接种棚内。菌袋接种汉中多采用开放式接种,一般在1月下旬进行,先将菌种足量放入棚内(按每袋菌棒0.25kg),再用二氯异尿酸钠消毒粉(保菇灵)进行棚内灭菌,30x4mx2.5m大棚用量为20包,灭菌4—5h。接种人员进入时用酒精喷雾灭菌,8人为一组,日接种20t,采用两端断面接种,先脱袋接种袋底菌种,再接种袋口,每袋用种0.2-0.25kg。
加葡萄糖(处理③)。在基础配方中添加牛肉膏和蛋白胨后,虫草生长与只添加无机盐相比没有明显差别,推测牛肉膏和蛋白胨提供的主要营养物质———磷酸盐、碳源、氮源和维生素在磷酸二氢钾和硫酸镁存在的情况下已并非限制性因子,即达到了营养饱和。因此再添加并不能有促进生长作用,反而由于添加物质过多导致培养基缝隙过密,不利于出草。处理⑤和处理⑥的无机盐和葡萄糖添加量相等,但分别添加了牛肉膏和蛋白胨,虫草生长出现统计学差异,这可能是由于牛肉膏和蛋白胨分别添加导致培养基中C:N比例改变,牛肉膏中提供大量碳源,而蛋白胨提供大量氮源,而只有在合适的C:N前提下,虫草子实体才能正常生长[7]。在葡糖糖提供了足够碳源的基础上,培养基中添加蛋白胨更适合虫草生长。在大米培养基中只添加有机质(处理②),虫草的生长和只添加无机盐相当,因此,在实际生产中,性质稳定而价格较低的无机盐更为实用。
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